欧美bbwhd老太大,久久九九久精品国产免费直播,久久久久免费毛a片免费一瓶梅,特级做人爱c级日本

當前位置:首頁  >  技術文章  >  都是qPCR,結果為何差距這么大?

都是qPCR,結果為何差距這么大?

更新時間:2023-03-25  |  點擊率:1054

qPCR技術是分子生物實驗中,常見的一種幾首手段。使用Quantitative Real Time PCR擴增裝置即qPCR儀,通過不同的化學原理和數學原理,在PCR過程中實時監(jiān)測核酸擴增產物的技術。qPCR實現了通過Ct值和標準曲線的分析對起始模板進行定量分析。

qPCR的熒光標記方法分為以添加熒光基團核酸探針為主的熒光探針法,以綠色染料為主的熒光染料嵌合法。


利用不同化學原理設計的qPCR實驗,

實驗結果可能會產生不小的差距!

本期內容,我們一起來聊聊這兩種常見的qPCR熒光標記方法有何不同,幫助大家選擇更符合自身實驗需求的方法。


熒光探針法

簡單來說,應用該原理的熒光探針,是由熒光基團+DNA寡核苷酸+淬滅基團構成。

探針由5’端標記有熒光報告基團、目標基因特異性結合的寡核苷酸序列以及3’端標記有淬滅基團以及與組成。

自然狀態(tài)下,探針完整,熒光報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,儀器不會檢測到熒光信號。

當存在目標序列時,目標DNA變性解鏈,熒光探針特異性結合到目標基因處。引物也結合在目標基因上,Taq酶又名DNA聚合酶,能將核苷酸添加到引物中,引物開始延伸。

Taq酶還具有5’-3’核酸外切酶活性。當引物延伸至探針結合處,可將探針水解,使熒光報告基團和淬滅基團分離,進而被qPCR儀檢測到熒光信號,熒光信號的強度與擴增得到的DNA的濃度成正比。

熒光信號被儀器檢測并采集得到“擴增曲線",通過熒光信號的強度反映出體系中雙鏈DNA的濃度。

熒光探針有許多不同種類,以應對不同的實驗需求,該方法特異性高,已經被廣泛地應用于基因檢測、病原體和病毒檢測、疾病耐藥基因篩查等領域。


德國MB支原體檢測試劑盒

Venor®Gem qEP

應用熒光探針法對支原體DNA進行檢測,準確率高,使用方便。

熒光染料嵌合法

該方法用到一種非特異性雙鏈DNA熒光染料,被激發(fā)后,顯示為綠色熒光。

該染料以一種非特異性方式,與雙鏈DNA(dsDNA)雙螺旋小溝區(qū)域相結合。游離的染料熒光信號微弱,在進行qPCR擴增生成dsDNA時,染料逐漸與dsDNA結合,熒光信號被很大程度放大,熒光信號的強度與擴增得到的dsDNA的濃度成正比。

熒光信號被儀器檢測并采集得到“擴增曲線",通過熒光信號的強度反映出體系中dsDNA的濃度。

德國MB支原體qPCR檢測試劑盒,應用熒光探針法原理,對支原體DNA進行檢測,具有特異性更強、靈敏度更高、可重復性更佳的特點。

支原體檢測方面,通過歐洲藥典和日本藥典方法學檢驗。



麻豆国产一区二区三区四区| 年轻护士的滋味中文字幕| 新婚小倩和邻居许老头| 日日噜噜噜夜夜爽爽狠狠| 免费无码又爽又刺激a片涩涩| 国产成人影院一区二区三区| 欧美大黑bbbbbbbbb| 少妇spa推油被扣高潮| H无码精品视频在线观看| 51久久成人国产精品麻豆| 女性人体图片| 3dmax动漫 在线观看| 顶开 肿胀 呻吟声粗喘| 小粉嫩精品a片在线视看| 国产97色在线 | 亚洲| 囯产香蕉97碰碰碰视频在线观看| 国内永久免费crm系统z在线| 头埋入双腿之间被吸到高潮| 男警察受呻吟双腿大开h漫画| 永久免费AV无码入口国语片| 妈妈的朋友中文字幕| 国产69精品久久久久| 欧美综合缴情五月丁香六月婷| 无敌神马在线观看免费完整一| 男女做爰猛烈吃奶摸视频| 亚洲av无码无在线观看红杏| 男女性动态激烈动全过程| 99久久国产综合精品麻豆| 国产乱码卡一卡2卡三卡四| 受被攻c哭高h视频网站| 国产98色在线 | 国产| 久别的草原在线影院电影观看中文| 初爱视频教程免费看| 日本极度色诱视频| 日韩欧美aⅴ综合网站发布| 嗯灬啊灬把腿张开灬a片小说| 国产午夜精品一区二区三区| 躺着把jiji向上摁平然后揉搓| 色婷婷久久综合丁香五月狠狠野花| 韩国v欧美v亚洲v日本v| 丰满大码的熟女在线视频|